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细胞复苏流程
发布时间:2016-11-17   点击次数:588次

细胞复苏流程


复苏操作步骤:
实验前准备:
1.将水浴锅预热至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
3.在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等
迅速解冻:
1.    迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化,时间控制在1分钟左右
离心去除冻存液:
1.  融解好的细胞迅速放进离心机中,2000r/min 或者600g离心2min
2.  吸弃上清液。
3.  用4-5ml完全培养基重悬细胞,吹打制成单细胞悬液,细胞浓度以5×105/ml为宜。
4.  将复苏好的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内,8-24小时后换液继续培养培养,换液的时间由细胞生长情况而定
 

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