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为什么ELISA实验结果不是我想要的?
发布时间:2017-05-02   点击次数:314次

为什么ELISA实验结果不是我想要的?

绝大多数ELISA实验人员zui头疼的问题,莫过于实验结果不理想。其实做科研实验,就是这样在不断探索中寻求真理。很难有人能够的实验成功。但是,我们在做实验过程中能够尽量避免哪些常犯的错误呢?今天让我们一起来看一下,影响ELISA实验结果不理想的原因有哪些?

1. 操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 c~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,是否符合要求。
2. 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。
3. 手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数,洗液在反应孑l内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑l间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
4. 要保证加液量一致 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。
5. 显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。elisa试剂盒的影响因素应选用有国家批准文号,质量靠得住的产品,不能图便宜,忽视质量保证。试剂应妥善保存于4℃冰箱内,在使用时先平衡至室温,不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完,剩余的试剂下次用时应先检查是否变质,显色剂如被污染变色将造成全部显色,导致错误结果。

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