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讨论细胞培养中常见的几个问题
发布时间:2017-06-06   点击次数:427次

讨论细胞培养中常见的几个问题

1.为什么同一个细胞,我养的和别人或者其他细胞库的不一样?

很多帖子都问到这个问题,自信点的站友可能会说,我们的细胞是从正规细胞库买的,应该没问题;没自信的战友可能会说,我细胞培养的不多,是不是我没养好。那我的观点是什么?我先贴几张细胞图片。

 

 

ATCC(美国模式培养物集存库)

 

 

中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心

 

 

协和细胞资源中心

 

 

中国典型培养物保藏中心细胞库中国科学院昆明细胞库

 

 

中国科学院昆明细胞库

细心的站友可能已经发现,这几张都是大家非常熟悉的Hela细胞的照片,只是来自不同细胞库,而这几个细胞库,都是国内外认可度比较高的细胞库,所以细胞可信度很高,即便如此,仔细观察会发现,细胞形态还是有一定差距,那为什么呢,很简答,打个不恰当的比喻,一对同卵双胞胎,如果从小失散,分别在两个不同的家庭成长,那么长大后,两个人无论外貌还是性格,出现差异的几率都比从小在一个家庭中长大的要大很多。那细胞也是一样的,如果分别保存在不同实验室,由不同实验员,用不同的试剂培养,经过一段时间,必然会有差异,但只要本质(基因水平)不变,那都应该被认可。所以我个人不建议站友从细胞形态来确认细胞类型,做个STR鉴定要严谨许多。

2.我的细胞该用什么培养条件,不同文献中怎么不一样?

这个问题其实和*个问题有所,不同细胞库保存同一细胞,会用相同的培养条件吗?我想还是举个例子更为直观些。

A549 人肺癌细胞,研究过肺癌细胞的站友对这个细胞应该非常熟悉,和Hela一样也是很常见的细胞,依旧以以上几个细胞库为例,我们看看他们培养A549的条件是怎么样的。

ATCC: 90%F 12K+10%F B S

中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心: 90%F 12K+10%F B S

协和细胞资源中心:  90%McCOY's Media+10%F B S 

中国典型培养物保藏中心细胞库: 90%F 12K+10%F B S 

中国科学院昆明细胞库:   85%RPMI 1640 +15%F B S

很明显,不同细胞库在培养同一细胞时的条件也是有差异的。这显然没有对错之分,只有合不合适,所以,这个问题上我的观点是,站友刚收到新细胞时,尽量和细胞来源处的培养条件保持一致,当细胞有一定冻存株时,可以根据实验室的具体情况作出调整,只要细胞可以正常增殖,那也是没有问题的。

暂时先总结这两个问题,有时间再和大家讨论其他问题。欢迎大家参与进来,说说自己的观点。

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