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小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒

更新时间:2018-05-26

简要描述:

Kit for Nuclear Factor Kappa B (NFkB)
小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中小鼠核因子κB(NFκB)含量.价格公道,现货供应.

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小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒实验原理,小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒实验方法,小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒实验步骤。

小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒:注意事项 

当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。 

 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。 

一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 

 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。 

 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。 

 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。 

 底物请避光保存。 

 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 

小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒原理:戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。

小鼠核因子κB(NFκB)检测试剂盒标记步骤:

(1) 称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室温静置。

(2) 反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱,用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟,收集棕色流出液。如体积大于5ml,则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中,缓慢搅拌。

(3) 将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml,搅拌下逐滴加入酶溶液中。

(4) 用1M PH9.5碳酸缓冲液0.25ml,继续搅拌3?小时。) 

(5) 加0.2M赖氨酸0.25ml,混匀后,置室温2小时。

(6) 在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵,置4℃1小时。

(7) 3000rpm离心半小时,弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次,zui后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。

(8) 将上述溶液装入透析袋中,对0.15M PH7.4的PB缓冲盐水透析,去除铵离子后(用萘氏试剂检测),10,000rpm离心30分钟去除沉淀,上清液即为酶结合物,分装后,冰冻保存。yb-E12334 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒 Rat eosinophil cationic protein (ECP) ELISA kit 说明书
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