小鼠野鼠色基因相关蛋白（AGRP）检测试剂盒

小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒实验原理，小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒实验方法，小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒实验步骤。

小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒：注意事项 

※当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。 

※ 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。 

※一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 

※ 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。 

※ 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。 

※ 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。 

※ 底物请避光保存。 

※ 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 

小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒原理：戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。

小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒标记步骤：

(1) 称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室温静置。

(2) 反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟，收集棕色流出液。如体积大于5ml，则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中，缓慢搅拌。

(3) 将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml，搅拌下逐滴加入酶溶液中。

(4) 用1M PH9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3?小时。) 

(5) 加0.2M赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。

(6) 在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃1小时。

(7) 3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，zui后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。

(8) 将上述溶液装入透析袋中，对0.15M PH7.4的PB缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。yb-E12810 大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 Rat soluble tumor necrosis factor receptor Ⅱ (TNFsR-Ⅱ) ELISA kit 说明书
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