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人神经胶质瘤细胞

描述:人神经胶质瘤细胞的处理方法:
1. 先从外包装盒拿出细胞瓶,在细胞瓶表面喷一层酒精,并小心去掉封口膜;
2. 在显微镜下观察细胞状态,并确定是否染菌,如有染菌,请立即拍照,并将细胞丢掉。

更新时间:2021-09-28
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厂商性质:生产厂家
详情介绍

人神经胶质瘤细胞货号规格培养基运输保存

yb-hxbz-1ml/株1640+10% FBS干冰运输液氮保存409

质量控制:本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。 培养条件:37℃,5% CO2,PH 值7.2~7.4,无菌恒温培养。 用途:本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。


神经胶质瘤细胞相关操作(注意:细胞操作都需严格按照无菌操作) 收到复苏好的贴壁细胞的处理方法:

1.先从外包装盒拿出细胞瓶,在细胞瓶表面喷一层酒精,并小心去掉封口膜;

2. 在显微镜下观察细胞状态,并确定是否染菌,如有染菌,请立即拍照,并将细胞丢掉;

3. 将培养瓶置于37°C,5% CO2 的无菌培养箱中培养4-6 小时;

4. 倒掉多余的培养基,留正常体积的培养基;

5. 重新将培养瓶置于37°C,5% CO2 的无菌培养箱中培养过夜;

6. 第二天传代。


收到冻存细胞的处理方法:

1.37°C水浴预热培养基;

2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);

3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;

4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入 T25培养瓶中,轻轻晃匀;

5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧);

6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。


传代:

1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;

2.37°C 水浴预热培养基;

3.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS 清洗细胞后,再加入1ml 胰酶消化细胞;

4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml 培养基终止消化;

5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;

6.将细胞移入离心管中,1000rpm 离心5min;

7.弃上清,加入15-20ml 的培养基重悬细胞后转入T75培养瓶中或按适当比例传到T25瓶中(确保细胞贴壁 后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104  cells/cm2  (2.5×105  cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保均 匀分布;

8.将培养瓶置于37°C,5% CO2的无菌培养箱中培养。


细胞冻存:

1.37°C 水浴预热培养基;

2.消化细胞后给细胞计数: 1) 洗净晾干血小板计数板和盖玻片,将盖玻片完全覆盖计数区; 2)充分混匀细胞,取少量(0.1-0.5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合,移液器吹吸混合均匀,用移液器取20ul 混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞,以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳。

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